心力衰竭是一种典型的心血管疾病终末期临床表现，在过去的二十年里，新的治疗心力衰竭的方案较为少见。心脏所需能量（三磷酸腺苷ATP)大部分来自线粒体的氧化代谢，而线粒体动力学（包括线粒体的裂变及融合）稳态是确保维持线粒体功能的关键。既有研究表明，动力相关蛋白1（Drp1）可以通过不同的方式被激活来驱动哺乳动物的线粒体分裂。过量的脂质摄取会增加Drp1活性，导致线粒体过度分裂和心脏功能障碍。因此，...

RNA甲基化m6A研究重要检测工具-高通量测序，本知识点介绍对于关注编码基因mRNA的甲基化修饰而言，我们再选择RNA提取时选择的方法-poly A提取法。mRNA是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A）尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在2...

IF:38.08 I Biolinkedin® Protein G Magnetic beads参与鱼类黏膜免疫球蛋白抗病毒感染的适应性免疫应答机制研究

急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)缺乏特异性治疗药物，新型AKI生物标志物胰岛素样生长因子结合蛋白7(Insulin-like growth factor binding protein 7, IGFBP7)已被美国食品药品监督管理局批准用于临床不同类型AKI的风险预测。2022年，安徽医科大学药学院药理学团队在肾脏领域权威期刊《国际肾脏病杂志(Kidney In...

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mRNA是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A）尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性标志。Biolinkedin® Ol...

DNA双链断裂是最严重的DNA损伤形式。同源重组修复是精准修复DNA双链断裂的主要机制，也是利用基因组编辑工具（如 CRISPR/Cas9）进行基因打靶的基础。然而，植物的同源重组效率很低，其调控机制也还很不清楚。转录因子SOG1是植物DNA损伤应答的核心蛋白之一，被认为是动物p53的同功能蛋白。p53是被研究最多的蛋白，也是最重要的抑癌蛋白。与p53相比，人们对SOG1还知之甚少。202...

A. 什么是包涵体？   包涵体是一种不溶的蛋白质形态，往往蛋白在大肠杆菌或其他表达宿主内高水平表达时，由于表达速率过快，部分蛋白部分折叠或错误折叠，会有暴露在外的疏水区与其他结构类似的蛋白形成的聚集物。B．如何尽量避免形成包涵体？   1.延缓蛋白表达，可以降低诱导温度或降低IPTG（0.01-0.1mM）并延长诱导时间，或者构建质粒时采用较弱的启动子。   2.更换标签质粒，比如使用含有...

我们体外表达蛋白过程经常会遇到蛋白失活的现象，蛋白质失活受多种因素影响，除了与蛋白本身特性外，储存条件也是关键。比如温度，水，PH，离子强度，保存时间以及容器等，不合适的储存条件会造成蛋白聚合，重要氨基酸的变化比如二硫键还原，肽键水解，氨基酸消旋，色氨酸，甲硫氨酸的氧化等，所以合适的保存条件对蛋白的稳定性至关重要，下面具体介绍几种常用的保存方法。目前蛋白保存以液体保存和冻干保存为主。因蛋白不...

缓冲体系在蛋白制备纯化过程中非常重要，合适缓冲液能确保蛋白活性和结构稳定。为了满足蛋白后续纯化，往往需要对缓冲液进行置换。下面介绍几种常见的纯化场景，场景一：针对分泌表达蛋白或抗体，其存在于培养基或腹水中，相对成分复杂，后续纯化需要置换缓冲体系，避免影响亲和纯化的效率。场景二：有些蛋白经过亲和纯化后需要进行进一步纯化（如离子交换层析），在进行离子交换之前需要将盐离子降低或pH调整，此时需要置...

IP（免疫沉淀）实验抗体如何选？

一、谷胱甘肽S-转移酶（GST）概述1.1 谷胱甘肽S-转移酶（GST）结构[1]谷胱甘肽S-转移酶（GST）是由多基因编码、具有多种功能的超家族酶，GST广泛存在于细菌、真菌、动物和植物体内的一种解毒系统中，其专一性催化还原型的谷胱甘肽巯基与其他化合物的亲电基团，生成谷胱甘肽衍生物，具有降低化学反应活性的效应。在各种生物体内，GSTs是由多个基因编码的、具有多种功能的一组同工酶，分子量为2...

一、金属螯合亲和技术1.1 金属螯合亲和技术概述及其原理[1]金属螯合亲和技术属于亲和技术的一个分支。1975年Porath首次发现某些蛋白质与某些金属离子（如Cu2+、Fe2+）之间的亲和力可以作为现代色谱技术中蛋白质分离与纯化的基础驱动力（主要包括Zn2+、Cd2+、Hg2+、Co2+、Ni2+等过渡金属离子），并指出固定金属亲和技术是基于蛋白质与金属离子的特异性结合的相互作用过程来实现...

自噬（Autophagy）是真核生物中一种高度保守的分解代谢过程，涉及到细胞器、大分子或入侵的微生物，隔离并转运至溶酶体进行降解。p62/SQSTM1（Sequestosome 1）是第一个被发现的，也是最重要的自噬受体，它具有与泛素（ubiquitin）和LC3相互作用的结构域，能结合泛素化修饰的蛋白，并运输到自噬体。近日，Military MedicalResearch （IF 34....

蛋白-蛋白相互作用（Protein-Protein Interaction, PPI）介导了许多的生物学过程，其在催化、转运、信号传导等许多生命过程中具有重要的意义。鉴定蛋白质与蛋白质之间的相互作用（protein-protein interaction，PPI）是后基因组时代的重要研究内容。 蛋白-蛋白相互作用类型a：两个球状蛋白预先形成一个表面，然后靠近再产生相互作用b：两个球状蛋白在靠...

一、Flag标签概述图1   立个Flag我们这里所说的Flag和平时大家说的立个flag可不是同一件事，初学者可别弄错了。亲和标签指的是对特定生物或化学配基具有高特异性的蛋白或短肽，兼具高亲和性、纯化条件温和、纯化步骤简易和适用性广的优势。而Flag融合标签作为其中的佼佼者，是专门为蛋白纯化和检测而设计的亲水性短肽，由八个氨基酸组成（Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-...

受自然生物学的启发，生物工程修饰细胞膜伪装纳米技术得到了广泛的研究。许多研究人员致力于开发部位特异性治疗药物递送系统。目前，各种肿瘤活性靶向配体（蛋白质、多肽、全长单抗）已被用于转基因细胞膜微囊。此外，细胞膜来源的囊泡作为小分子的载体，由于其具有高生物相容性和包封率、大小可控、易于遗传修饰和非常灵活地包裹各种生物活性分子的优点而备受关注。将近红外（NIR）荧光染料包裹在生物工程纳米囊泡中可以...

一、亲和标签和标签抗体20世纪70年代亲和标签技术极大地促进了外源融合蛋白和蛋白质复合体的生产纯化，蛋白或者短肽亲和标签现已作为蛋白研究领域必不可少的工具。亲和标签指的是对特定生物或化学配基具有高特异性的蛋白或短肽，兼具高亲和性、纯化条件温和、纯化步骤简易和适用性广的优势。作为一个无可挑剔的亲和标签需要满足以下几点特质：（1）通用性。在任何表达宿主或系统中表达的融合蛋白均能实现分离和纯化。（...

Biolinkedin夏季狂欢! 全场送送送Biolinkedin夏季狂欢活动——活动日期：2022年6月16日至2022年7月31日1. 凡购买蛋白磁珠系列 1mL包装规格，送四孔磁力架一个2. 凡购买蛋白磁珠系列 5mL包装规格，送金士顿U盘（64G）一个1. 凡购买抗体磁珠系列 1mL包装规格，送四孔磁力架一个2. 凡购买抗体磁珠系列 5mL包装规格，送旋转混匀仪一台Biolinked...

一、抗体亲和纯化纯化抗体的方法多种多样，其选择取决于后续应用、来源种类、免疫球蛋白(Ig)类别和亚类以及起始材料的来源。认识到没有一种单一的方法可以满足所有应用的需求是很重要的，但是本文中详细介绍了适用于大多数IgG纯化的常用方法。为了最大限度地纯化IgG，我们利用高容量IgG结合特异性细菌蛋白固定在固相载体上，如琼脂糖凝胶或琼脂糖磁珠。用于纯化抗体的细菌蛋白，如(1)来自金黄色葡萄球菌的P...