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IF: 18.998 I Biolinkedin ® protein A/G magnetic beads参与IGFBP7肾脏损伤和炎症中的调控机制的研究

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作者:Biolinkedin

急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)缺乏特异性治疗药物,新型AKI生物标志物胰岛素样生长因子结合蛋白7(Insulin-like growth factor binding protein 7, IGFBP7)已被美国食品药品监督管理局批准用于临床不同类型AKI的风险预测。

2022年,安徽医科大学药学院药理学团队在肾脏领域权威期刊《国际肾脏病杂志(Kidney International)》(IF=18.998)发表了题为《胰岛素样生长因子结合蛋白7通过减轻聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1的降解,促进急性肾损伤(Insulin-like growth factor binding protein 7 promotes acute kidney injuryby alleviating poly ADP ribose   polymerase 1 degradation)》的原创性研究论文。

博士研究生庾聚涛、硕士研究生胡晓薇、博士研究生杨琴为本文的并列第一作者,药学院孟晓明教授和第一附属医院泌尿外科王伟副教授为该论文的通讯作者.


该研究创新性地发现了IGFBP7作为风险预测因子,同时也具有促进AKI发生发展的重要功能。作者分析了AKI患者、各类动物模型中血清、尿液以及肾脏中IGFBP7的表达变化和定位。通过构建IGFBP7全身性敲除、肾脏条件性敲除小鼠及基因回补实验,发现IGFBP7促进肾脏炎症和程序死亡的新功能。并通过质谱找到了与IGFBP7相互作用的关键靶蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1PARP1),验证了IGFBP7主要与PARP1BRCT结构域结合,提出IGFBP7通过拮抗泛素化E3连接酶环指蛋白4RNF4),抑制PARP1泛素化降解,促进AKI的发生发展。该研究加深了人们对IGFBP7在肾脏损伤和炎症中功能和机制的认识,也为早期预防和治疗AKI提供了新的思路。

划重点:

本研究中,涉及质谱筛选(IP-MS)、免疫共沉淀(Co-IP)及泛素化检测等相关实验,使用了Biolinkedin®protein A/Gmagnetic beads

F1.jpg

利用质谱筛选与IGFBP7可能存在互作的蛋白,并发现PARP1。(IP: IGFBP7



F2.jpg

在相应的细胞模型上通过Co-IP验证IGFBP7PARP1存在互作。


在相应的小鼠模型上通过Co-IP验证IGFBP7PARP1存在互作。



根据PARP1不同的domain,构建相应的截断体,通过Co-IP明确IGFBP7PARP1互作的domain



分别过表达及敲低IGFBP7后,PARP1泛素化水平发生明显变化。



RNF4PARP1泛素化进程中发挥重要作用。


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