Protein A磁珠Protein G磁珠Protein L磁珠Protein A/G磁珠Protein A琼脂糖凝胶Protein G琼脂糖凝胶Protein L琼脂糖凝胶Protein A/G琼脂糖凝胶Anti-HA磁珠Anti-Myc磁珠Anti-DYKDDDDK磁珠(原Flag磁珠)链霉亲和素磁珠Anti-DYKDDDDK琼脂糖凝胶(原Flag凝胶)Anti-GST磁珠Anti-His磁珠Anti-GFP磁珠伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠Protein A琼脂糖磁珠Protein G琼脂糖磁珠Protein A/G琼脂糖磁珠免疫沉淀磁珠His蛋白纯化琼脂糖凝胶GST蛋白纯化琼脂糖凝胶His蛋白纯化琼脂糖磁珠GST蛋白纯化琼脂糖磁珠Protein A Plus 琼脂糖磁珠Protein G Plus 琼脂糖磁珠Protein A/G Plus 琼脂糖磁珠蛋白抗体纯化磁珠PCR产物提取磁珠Oligo-dT包被磁珠核酸提取纯化磁珠羟基磁珠氨基磁珠羧基磁珠醛基磁珠NHS磁珠基础磁珠Protein A免疫(共)沉淀试剂盒Protein G免疫(共)沉淀试剂盒经典Protein A/G免疫(共)沉淀试剂盒Anti-HA免疫(共)沉淀试剂盒Anti-Myc免疫(共)沉淀试剂盒Anti-DYKDDDDK免疫(共)沉淀试剂盒Anti-DYKDDDDK免疫(共)沉淀试剂盒(凝胶法)Anti-GST免疫(共)沉淀试剂盒Anti-His免疫(共)沉淀试剂盒Anti-GFP免疫(共)沉淀试剂盒基础免疫(共)沉淀试剂盒His Pull-down试剂盒GST Pull-down试剂盒分子互作试剂盒His标签蛋白纯化试剂盒GST标签蛋白纯化试剂盒蛋白纯化试剂盒mRNA纯化试剂盒基础mRNA纯化试剂盒核酸提取纯化试剂盒生物配体快速偶联试剂盒生物偶联试剂盒血浆/血清外泌体提取试剂盒(磁珠法)细胞上清外泌体提取试剂盒(磁珠法)尿液外泌体提取试剂盒(磁珠法)外泌体研究产品双排4孔 1.5mL磁力架双排8孔 1.5mL磁力架双排16孔 1.5mL磁力架双排4孔 15mL磁力架双排4孔 50mL磁力架八联排 0.2mL磁力架(PCR)双排八孔1.5mL磁力架(铝合金款)双排十六孔1.5mL磁力架(铝合金款)96孔PCR板磁力架(铝合金款)96孔酶标板磁力架(铝合金款)手持均质仪配套设备生物偶联技术高通量蛋白纯化外泌体定向改造IVD试剂研发服务磁珠应用外泌体专题纳米抗体神经科学领域新冠相关PROTAC技术翎因动态行业新闻优惠促销产品支持技术支持客户发表文章学习资源企业简介企业文化团队风采生产与质量联系我们
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【推荐】重组蛋白失活的原因以及如何保存?

作者:Biolinkedin

我们体外表达蛋白过程经常会遇到蛋白失活的现象,蛋白质失活受多种因素影响,除了与蛋白本身特性外,储存条件也是关键。

比如温度,水,PH,离子强度,保存时间以及容器等,不合适的储存条件会造成蛋白聚合,重要氨基酸的变化比如二硫键还原,肽键水解,氨基酸消旋,色氨酸,甲硫氨酸的氧化等,所以合适的保存条件对蛋白的稳定性至关重要,下面具体介绍几种常用的保存方法。

目前蛋白保存以液体保存和冻干保存为主。因蛋白不同维持蛋白稳定选择措施不同。

液体保存

选择液体保存可以从温度,pH,蛋白浓度以及保护剂添加几个因素考虑。

温度:一般蛋白质低温保存,短期可以4℃保存,长期可以储存于-20℃或-70℃,用时迅速融化。

pH:大多数蛋白质在较窄PH范围稳定,一般在等电点附近,可调整合适pH范围保存。


蛋白浓度:液体蛋白质受水化影响,保存浓度不易过低,过低浓度会造成多亚基蛋白和辅助因子解离,变性,聚集沉淀,需要调整合适的蛋白浓度。

保护剂添加:长期保存蛋白(酶类)常常加入某些稳定剂,比如糖类,多元醇(甘油),多糖,氨基酸及其衍生物。还有一类离子稳定剂如盐类

冻干保存

制成干粉或结晶冻干是将溶剂或悬浮介质在低温下冷冻,然后将其由固态直接升华为气态的一种干燥方法。该方法能够很好地保持物质骨架的稳定性,并且在复融后也不改变。

冻干一般包括三个过程:预冻结、升华干燥、解析干燥。

尽管冻干能够较好的维持蛋白的稳定性,但是在冻干过程中添加必要的稳定剂以防止蛋白质的变性尤为重要,这其中以非还原型的海藻糖和蔗糖对蛋白质的保护最有效。冻干过程应该避免使用还原型糖,如葡萄糖,麦芽糖,乳糖等,其会引起美拉德(Maillard)反应降解蛋白质。因此在冷冻干燥过程中选择合适的保护剂。

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参考文献

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[2] Imamura K , Iwai M , Ogawa T , et al. Evaluation of hydration statesof protein in freeze‐dried amorphous sugar matrix[J]. Journal of PharmaceuticalSciences, 2010, 90(12): 1955-1963.

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