Protein A磁珠Protein G磁珠Protein L磁珠Protein A/G磁珠Protein A琼脂糖凝胶Protein G琼脂糖凝胶Protein L琼脂糖凝胶Protein A/G琼脂糖凝胶Anti-HA磁珠Anti-Myc磁珠Anti-DYKDDDDK磁珠(原Flag磁珠)链霉亲和素磁珠Anti-DYKDDDDK琼脂糖凝胶(原Flag凝胶)Anti-GST磁珠Anti-His磁珠Anti-GFP磁珠伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠Protein A琼脂糖磁珠Protein G琼脂糖磁珠Protein A/G琼脂糖磁珠免疫沉淀磁珠His蛋白纯化琼脂糖凝胶GST蛋白纯化琼脂糖凝胶His蛋白纯化琼脂糖磁珠GST蛋白纯化琼脂糖磁珠Protein A Plus 琼脂糖磁珠Protein G Plus 琼脂糖磁珠Protein A/G Plus 琼脂糖磁珠蛋白抗体纯化磁珠PCR产物提取磁珠Oligo-dT包被磁珠核酸提取纯化磁珠羟基磁珠氨基磁珠羧基磁珠醛基磁珠NHS磁珠基础磁珠Protein A免疫(共)沉淀试剂盒Protein G免疫(共)沉淀试剂盒经典Protein A/G免疫(共)沉淀试剂盒Anti-HA免疫(共)沉淀试剂盒Anti-Myc免疫(共)沉淀试剂盒Anti-DYKDDDDK免疫(共)沉淀试剂盒Anti-DYKDDDDK免疫(共)沉淀试剂盒(凝胶法)Anti-GST免疫(共)沉淀试剂盒Anti-His免疫(共)沉淀试剂盒Anti-GFP免疫(共)沉淀试剂盒基础免疫(共)沉淀试剂盒His Pull-down试剂盒GST Pull-down试剂盒分子互作试剂盒His标签蛋白纯化试剂盒GST标签蛋白纯化试剂盒蛋白纯化试剂盒mRNA纯化试剂盒基础mRNA纯化试剂盒核酸提取纯化试剂盒生物配体快速偶联试剂盒生物偶联试剂盒血浆/血清外泌体提取试剂盒(磁珠法)细胞上清外泌体提取试剂盒(磁珠法)尿液外泌体提取试剂盒(磁珠法)外泌体研究产品双排4孔 1.5mL磁力架双排8孔 1.5mL磁力架双排16孔 1.5mL磁力架双排4孔 15mL磁力架双排4孔 50mL磁力架八联排 0.2mL磁力架(PCR)双排八孔1.5mL磁力架(铝合金款)双排十六孔1.5mL磁力架(铝合金款)96孔PCR板磁力架(铝合金款)96孔酶标板磁力架(铝合金款)手持均质仪配套设备生物偶联技术高通量蛋白纯化外泌体定向改造IVD试剂研发服务磁珠应用外泌体专题纳米抗体神经科学领域新冠相关PROTAC技术翎因动态行业新闻优惠促销产品支持技术支持客户发表文章学习资源企业简介企业文化团队风采生产与质量联系我们
Lab  on  the Beads

【重磅推出】Biolinkedin® mRNA纯化试剂盒-15min一站式搞定mRNA

作者:Biolinkedin


mRNA是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA3’端存在20-30个腺苷酸组成的PolyA)尾,通常用PolyA+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志。

Biolinkedin® Oligo (dT)25磁珠设计用于从真核总RNA或直接从细胞,动植物组织的粗提物中快速分离高度纯化的完整mRNA。分离的mRNA可直接用于大多数下游应用中分子生物学:RT-PCR,固相cDNA文库构建,S1核酸酶分析,核糖核酸酶保护测定,引物延伸,点和槽杂交,体外翻译实验,RACE,减性杂交,northern分析,基因克隆和基因表达分析。

Biolinkedin® Oligo (dT)25磁珠使用依赖于mRNAPloy(A)尾部与磁珠表面的Poly(T)序列之间的碱基互补配对。利用标准杂交条件,可以很容易地将含有Poly(A)mRNA结合到oligo-dT上面,其他RNA种类(rRNAtRNA)不包含poly(A)序列,因此不会与oligo-dT磁珠结合。可以在15分钟内完成,而无需准备总RNA或执行任何其他纯化步骤。

特点

1.      快速温和的程序可获得完整的纯 mRNA

2.      高纯 mRNA 分离,cDNA 合成上游的最佳选择

3.      高灵敏度的 mRNA 分离可以用超小量的初始样品合成 cDNA 和构建 cDNA 文库。(可以用单细胞构建 cDNA 文库)

Biolinkedin® Oligo (dT)25磁珠能特异地靶向并捕获多种粗提初始样品的 mRNA 转录组。弃除不与磁珠结合的核糖体 RNADNA、蛋白质和小 RNA 分子(例如转运 RNAmicro RNA 小核仁 RNA)。只捕获多聚腺苷酸化的 RNA (mRNA)可分离出纯 mRNA,无需进行核糖体 RNA 消除或提取后的 DNase 处理。

应用领域

l   基因克隆

l   cDNA 合成、cDNA 文库构建

l   RT-PCR、定量 RT-PCR

l   RPA(核糖核酸酶保护试验)

l   消减杂交

l   斑点/狭线杂交

l   引物延伸

成分组成


实验流程

1.     以下实验方案针对纯化75ugTotal RNA,根据需要可以按比例放大。

2.     50uL含有75ug Total RNA ,65°C孵育2min,打开RNA二级结构,结束后迅速置于冰上。

3.     50μLRNA溶液加入至50μL洗涤后的磁珠,吹打混合均匀。即每75μgRNA使用1mg洗涤后且溶于50μL结合缓冲液的磁珠结合。

4.     将上述混合液室温下旋转混合1015min

5.     磁性分离,静置1min,去上清。

6.     室温下用200uL洗涤液清洗磁珠,小心吹打混匀,磁性分离,去除可能的污染物。重复操作一次。

7.     加入1020μL 10mM Tris-HCl pH7.5RNase-Free H2O6575°C孵育2min,然后快速将含有mRNA的上清液转移到新的Rnase-free EP管。

Biolinkedin® Oligo(dT)25磁珠纯化mRNA示意图


Biolinkedin® Oligo (dT)25纯化试剂盒可应用于mRNA的纯化,通过亲和结合mRNApoly A尾巴进行纯化,大大简化了mRNA的捕获过程。具有耐受高盐、高pH和高温,使用简单,不需使用任何易燃、有毒的试剂。

实验案例

针对2ug 小鼠Total RNA进行mRNA纯化,以等量初始总RNA为对照,通过Real-time PCR检测以评估mRNA捕获效率。

检测基因:GAPDH

实验结果:

扩增曲线


溶解曲线


CT

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