产品描述
Biolinkedin® 琼脂糖磁珠（Magnetic Agarose Beads）系列产品具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羟基官能团和相对集中的粒径等特点，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。
Protein A琼脂糖磁珠产品是由琼脂糖磁珠与Protein A共价结合形成的复合微粒。该产品具有更高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率，洗脱条件更均一，一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。本产品为微米级磁性微球，不需要离心操作，可大幅度缩短抗体吸附所需的时间。本产品适用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化，也可用于抗体固定及其它相关研究。
产品信息
项目 | Protein A 琼脂糖磁珠 |
平均粒径 | 30~100 µm |
浓度 | 20%（v/v） |
配基 | Protein A |
介质 | 磁性琼脂糖微球 |
抗体结合能力 | >20mg Human IgG/mL Beads |
保质期 | 在2-8℃稳定保存，保质期两年 |
推荐缓冲液：
Binding/Washing buffer | 0.5M NaCl，20 mM Na2HPO4, pH 7.0 |
Elution buffer | 100 mM Gly, pH 3.0 |
Neutrilization buffer | 1.0 M Tris-HCl, pH 8.5 |
产品优势
1. 具有高效的抗体结合能力和超低非特异性吸附的性能。
2. 操作省时、简便、温和
3. 产品稳定性高。
4. 抗体洗脱体系更接近中性
5. 可重复利用
操作流程（以纯化人血清 IgG 为例）
1. 样品准备
上样之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用Binding/Washing buffer对血清样品、腹水或细胞培养液稀释，或者样品用Binding/Washing buffer透析。样品在上样前建议离心或用0.22μm或 0.45μm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率。
2. 磁珠准备
将Protein A琼脂糖磁珠颠倒数次，混合均匀，取一定量的磁珠悬浮液，转移至离心管中，放置在磁力架上，磁性分离1min，弃上清。然后添加1-2倍体积Binding/Washing buffer，使用枪头反复吹打5次，然后置于磁力架上，磁性分离1min，弃上清，重复洗涤2次。
3. 抗体吸附
将上述预处理好磁珠与样品混合，置于翻转混合仪孵育约30-60min后，然后置于磁力架上，磁性分离1min，待溶液变澄清后，弃上清。
4. 洗杂
向离心管中加入5倍磁珠体积的Binding/Washing buffer，振荡悬浮，置于磁力架上，磁性分离1min，待溶液变澄清后，弃上清。重复两次或多次。
5. 抗体洗脱
在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的Elution buffer，用移液器吹打5次， 然后在室温下置于翻转混合仪孵育5-10min，然后置于磁力架上，磁性分离1min，待溶液变澄清后，吸取上清，收集洗脱组分，即为目标抗体。
6. 中和洗脱组分
向洗脱组分中加入洗脱体积十分之一的Neutrilization buffer，调节pH值至7.0-8.0。
7. 磁珠保存
使用后的磁珠用1mL Elution buffer重悬磁珠，然后置于磁力架上，磁性分离1min，待溶液变澄清后，弃上清。重复两次。再加入1mL Binding/Washing buffer，悬浮磁珠，然后置于磁力架上，磁性分离1min，待溶液变澄清后，弃上清。再按照4-5倍磁珠体积加入20%乙醇，置于2～8℃保存。
8. SDS-PAGE检测
将使用纯化产品得到的样品（包括流穿组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。
注意事项
1. 进行抗体纯化操作之前，请务必认真阅读本操作说明书。
2. 微球使用前应充分振荡均匀。
3. 微球应保存在储存溶液中，防止干燥。
4. 请勿将微球冷冻或离心，以免引起不可逆聚集。
5. 本产品仅供研究使用。
资料下载
Protein A 琼脂糖磁珠产品说明书
