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LAB  ON THE MAGNETICBEADS
产品详情
Protein G 琼脂糖磁珠
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Protein G 琼脂糖磁珠
货号: L-2006/L-2006A
规格: 2mL/10mL
价格: ¥ 999/3999
产品详情

产品描述

Biolinkedin® 琼脂糖磁珠(Magnetic Agarose Beads)系列产品具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羟基官能团和相对集中的粒径等特点,是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。

Protein G琼脂糖磁珠产品是由琼脂糖磁珠与Protein G共价结合形成的复合微粒。该产品具有更高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率,洗脱条件更均一,一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。本产品为微米级磁性微球,不需要离心操作,可大幅度缩短抗体吸附所需的时间。本产品适用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化,也可用于抗体固定及其它相关研究。


产品信息

项目

Protein G 琼脂糖磁珠

平均粒径

30~100   µm

浓度

20%(v/v)

配基

Protein G

介质

磁性琼脂糖微球

抗体结合能力

>15mg   Human IgG/mL Beads

保质期

在2-8℃稳定保存,保质期两年

推荐缓冲液:

Binding/Washing   buffer

0.5M NaCl,20 mM Na2HPO4,   pH 7.0

Elution   buffer

100 mM Gly, pH 3.0

Neutrilization   buffer

1.0 M Tris-HCl, pH 8.5


产品优势

1. 具有高效的抗体结合能力和超低非特异性吸附的性能。

2. 操作省时、简便、温和

3. 产品稳定性高。

4. 抗体洗脱体系更接近中性

5. 可重复利用


操作流程(以纯化人血清 IgG 为例)

1. 样品准备

上样之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用Binding/Washing buffer对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用Binding/Washing buffer透析。样品在上样前建议离心或用0.22μm或 0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率。

2. 磁珠准备

Protein G琼脂糖磁珠颠倒数次,混合均匀,取一定量的磁珠悬浮液,转移至离心管中,放置在磁力架上,磁性分离1min,弃上清。然后添加1-2倍体积Binding/Washing buffer,使用枪头反复吹打5次,然后置于磁力架上,磁性分离1min,弃上清,重复洗涤2次。

3. 抗体吸附

将上述预处理好磁珠与样品混合,置于翻转混合仪孵育约30-60min后,然后置于磁力架上,磁性分离1min,待溶液变澄清后,弃上清。

4. 洗杂

向离心管中加入5倍磁珠体积的Binding/Washing buffer,振荡悬浮,置于磁力架上,磁性分离1min,待溶液变澄清后,弃上清。重复两次或多次。

5. 抗体洗脱

在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的Elution buffer,用移液器吹打5次, 然后在室温下置于翻转混合仪孵育5-10min,然后置于磁力架上,磁性分离1min,待溶液变澄清后,吸取上清,收集洗脱组分,即为目标抗体。

6. 中和洗脱组分

向洗脱组分中加入洗脱体积十分之一的Neutrilization buffer,调节pH值至7.0-8.0。

7. 磁珠保存

使用后的磁珠用1mL Elution buffer重悬磁珠,然后置于磁力架上,磁性分离1min,待溶液变澄清后,弃上清。重复两次。再加入1mL Binding/Washing buffer,悬浮磁珠,然后置于磁力架上,磁性分离1min,待溶液变澄清后,弃上清。再按照4-5倍磁珠体积加入20%乙醇,置于2~8℃保存。

8. SDS-PAGE检测

将使用纯化产品得到的样品(包括流穿组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。

注意事项

1. 进行抗体纯化操作之前,请务必认真阅读本操作说明书。

2. 微球使用前应充分振荡均匀。

3. 微球应保存在储存溶液中,防止干燥。

4. 请勿将微球冷冻或离心,以免引起不可逆聚集。

5. 本产品仅供研究使用。

资料下载

Protein G 琼脂糖磁珠‍产品说明书


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